产品介绍
链霉亲和素Agarose是一种专门用于亲和层析的分离介质。该产品由具有亲和作用的链霉亲和素共价地结合于琼脂糖微球表面而制成。链霉亲和素可以高效特异结合生物素标记的生物分子从而实现目标分子的高效纯化。本产品适用于从复杂混合物中分离并富集具有链霉亲和素结合能力的各类生物分子。
【实验步骤】
1、用缓冲液(如PBS)预先平衡琼脂糖微球,平衡是清洗beads,将beads中溶液置换成做此次实验一样的溶液。分装agarose,用剪过的枪头吸出需要量的beads,然后加入一定量的缓冲液,上下颠倒混匀beads,随后800g离心5min,如此重复3次便可。推荐每个样品20-30ul纯beads。
2、将样品混合物加入到预先平衡的链霉亲和素agarose中,并在4℃下垂直混匀3小时。垂直混匀是让样品置于垂直混匀仪上,然后自动旋转,代替上下颠倒,使得样品和beads能充分接触。
3、利用PBS溶液清洗beads,以除去非特异性结合。800g离心5min,重复3-5次。
4、充分除去上清,然后加入SDS sample buffer100℃煮5-10min,高速20000g离心5min后,上清western 检测。若是质谱检测,wb后切胶酶解,纯化后上机检测。经煮后样品从beads脱落,目的蛋白没有活性;若需要得到有活性的蛋白,则不能用煮这种方法,需要用生物素竞争性洗脱。
【注意事项】
链霉亲和素agarose在使用前需预先平衡。在吸取琼脂糖微球时,必须剪掉枪头,孵育在4℃下进行,以避免目标分子的降解。如需更好的分离效果,可根据需要调整缓冲液的成分和pH值。离心过程需要轻柔,推荐800g。使用过程中,请遵循实验室的安全操作规程,确保实验室人员的安全。
【产品实验结果及对比】
【质量保证】
链霉亲和素Agarose的每批产品实行严格质量检验,并进行多次反复实验验证,以确保产品质量。请用户使用前务必认真阅读本手册。
【使用限制】
本产品仅供科研使用。在确认产品质量出现问题时,本公司承诺为客户免费更换等量的质量合格产品。在所有情况下,本公司对此产品所承担的责任,仅限于此产品的价值本身。
规格/储存条件/有效期
规格 | 1ml |
储存条件 | 2-8℃ |
有效期 | 18个月 |
COA下载