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【产品介绍】

  离心式快速脱盐预装柱,填料颗粒粒径在57-80微米,适合将分子量在5KD以下的和分子量5KD以上的物质分离开来,对盐和小分子的滞留率在95%以上,几乎等体积回收,样品不会被稀释,可以在出色地完成蛋白质脱盐的同时保持极高的回收率。无需装柱,代替比较耗时的传统透析处理,以达到快速纯化蛋白质/替换蛋白质缓冲液的目的。只需简单的几次离心,即可完成样品的脱盐或缓冲液置换实验。

 

  1、脱盐

  2、置换缓冲液
 

【产品规格】

  柱体积:0.7毫升;    上样量:100-200微升

【工作环境】

  PH:2-13;温度:4-30ºC

【产品特点】

  1、操作方便,免去了繁琐的透析过程,10分钟内即可完成样品处理。

  2、建议一次性使用(也可再生后重复使用),稳定性好,在所用常用缓冲液体(PBS,Tris-Cl、碳酸钠-碳酸氢钠等)中稳定。

  3、使用灵活,可根据自身样品体积来适当增减柱体积。

 

【操作步骤】

  1、平衡预装柱。加入800μl样品所需的缓冲液,静置3min,1000×g离心3min。

  2、样品处理。加入需要处理的蛋白样品,静置30s,1000×g离心3min,收集回收样品,保存备用。

  3、脱盐柱的再生和保存

将使用过的脱盐柱,共4次加入200μl含2M NaCl的PBS溶液,静置2min,1000×g离心3min。然后3次加入200μl去离子水,静置3min,1000×g离心3min。

将处理好的脱盐柱,加入20%乙醇溶液,保存即可。

 

【回收效果】

  样品脱盐后的回收率与样品的浓度,以及上样体积相关。样品浓度越高,其回收率越高;同时在推荐的样品上样量范围内,上样量约大,其回收率也会随之升高。通常脱盐后蛋白的回收率在80-95%。

 

【注意事项】

  1、样品处理量要在柱子处理范围内,过多会导致脱盐不完全,过少会导致样品回收率下降;

  2、填料在高浓度醇溶液或饱和盐溶液中会有失水收缩现象,请勿将上述溶液进行过柱;

  3、加样时尽量均匀加至管中心位置;

  4、当样品浓度过低时,需先将样品浓缩到所需体积或所需浓度。

 

【常见问题】

常见问题

可能原因

解决方法

蛋白回收率偏低

1、蛋白浓度过低(<0.01mg/ml)

2、所置换的缓冲液成分或PH非最适缓冲液,产生了非特异性吸附

1、现对蛋白液进行适当浓缩后脱盐

2、更换适合的缓冲液,并充分平衡预装柱2-3次

蛋白回收后出现浑浊或沉淀

1、缓冲液非最适缓冲液

2、缓冲液中的某些离子被除去了,导致蛋白质等电点聚沉

更换适合的缓冲液,并充分平衡预装柱2-3次

脱盐不干净

盐离子浓度过高(>0.5M)

根据盐离子浓度适当增加脱盐次数或稀释后脱盐

 

 

【产品信息】 

品牌

货号

产品名称

规格

上样量

KEL Biotech

P0202-30

离心式快速脱盐柱5KD 0.7ml

30个/包

100-200ul

KEL Biotech

P0206-30

离心式快速脱盐柱5KD 1.5ml

30个/包

200-400ul

KEL Biotech

P0204-30

离心式快速脱盐柱5KD 3ml

30个/包

500-1000ul

KEL Biotech

P0201-30

离心式快速脱盐柱5KD 6ml

30个/包

1000-2000ul

KEL Biotech

P0203-30

离心式快速脱盐柱30KD 0.7ml

30个/包

100-200ul

KEL Biotech

P0207-30

离心式快速脱盐柱30KD 1.5ml

30个/包

200-400ul

KEL Biotech

P0205-30

离心式快速脱盐柱30KD 3ml

30个/包

500-1000ul

KEL Biotech

P0208-30

离心式快速脱盐柱30KD 6ml

30个/包

1000-2000ul


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