产品介绍
【产品介绍】
离心式快速脱盐预装柱,填料颗粒粒径在57-80微米,适合将分子量在5KD以下的和分子量5KD以上的物质分离开来,对盐和小分子的滞留率在95%以上,几乎等体积回收,样品不会被稀释,可以在出色地完成蛋白质脱盐的同时保持极高的回收率。无需装柱,代替比较耗时的传统透析处理,以达到快速纯化蛋白质/替换蛋白质缓冲液的目的。只需简单的几次离心,即可完成样品的脱盐或缓冲液置换实验。
1、脱盐
2、置换缓冲液
【产品规格】
柱体积:0.7毫升; 上样量:100-200微升
【工作环境】
PH:2-13;温度:4-30ºC
【产品特点】
1、操作方便,免去了繁琐的透析过程,10分钟内即可完成样品处理。
2、建议一次性使用(也可再生后重复使用),稳定性好,在所用常用缓冲液体(PBS,Tris-Cl、碳酸钠-碳酸氢钠等)中稳定。
3、使用灵活,可根据自身样品体积来适当增减柱体积。
【操作步骤】
1、平衡预装柱。加入800μl样品所需的缓冲液,静置3min,1000×g离心3min。
2、样品处理。加入需要处理的蛋白样品,静置30s,1000×g离心3min,收集回收样品,保存备用。
3、脱盐柱的再生和保存
将使用过的脱盐柱,共4次加入200μl含2M NaCl的PBS溶液,静置2min,1000×g离心3min。然后3次加入200μl去离子水,静置3min,1000×g离心3min。
将处理好的脱盐柱,加入20%乙醇溶液,保存即可。
【回收效果】
样品脱盐后的回收率与样品的浓度,以及上样体积相关。样品浓度越高,其回收率越高;同时在推荐的样品上样量范围内,上样量约大,其回收率也会随之升高。通常脱盐后蛋白的回收率在80-95%。
【注意事项】
1、样品处理量要在柱子处理范围内,过多会导致脱盐不完全,过少会导致样品回收率下降;
2、填料在高浓度醇溶液或饱和盐溶液中会有失水收缩现象,请勿将上述溶液进行过柱;
3、加样时尽量均匀加至管中心位置;
4、当样品浓度过低时,需先将样品浓缩到所需体积或所需浓度。
【常见问题】
常见问题 | 可能原因 | 解决方法 |
蛋白回收率偏低 | 1、蛋白浓度过低(<0.01mg/ml) 2、所置换的缓冲液成分或PH非最适缓冲液,产生了非特异性吸附 | 1、现对蛋白液进行适当浓缩后脱盐 2、更换适合的缓冲液,并充分平衡预装柱2-3次 |
蛋白回收后出现浑浊或沉淀 | 1、缓冲液非最适缓冲液 2、缓冲液中的某些离子被除去了,导致蛋白质等电点聚沉 | 更换适合的缓冲液,并充分平衡预装柱2-3次 |
脱盐不干净 | 盐离子浓度过高(>0.5M) | 根据盐离子浓度适当增加脱盐次数或稀释后脱盐 |
【产品信息】
品牌 | 货号 | 产品名称 | 规格 | 上样量 |
KEL Biotech | P0202-30 | 离心式快速脱盐柱5KD 0.7ml | 30个/包 | 100-200ul |
KEL Biotech | P0206-30 | 离心式快速脱盐柱5KD 1.5ml | 30个/包 | 200-400ul |
KEL Biotech | P0204-30 | 离心式快速脱盐柱5KD 3ml | 30个/包 | 500-1000ul |
KEL Biotech | P0201-30 | 离心式快速脱盐柱5KD 6ml | 30个/包 | 1000-2000ul |
KEL Biotech | P0203-30 | 离心式快速脱盐柱30KD 0.7ml | 30个/包 | 100-200ul |
KEL Biotech | P0207-30 | 离心式快速脱盐柱30KD 1.5ml | 30个/包 | 200-400ul |
KEL Biotech | P0205-30 | 离心式快速脱盐柱30KD 3ml | 30个/包 | 500-1000ul |
KEL Biotech | P0208-30 | 离心式快速脱盐柱30KD 6ml | 30个/包 | 1000-2000ul |
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